2025-10-15 14:13:08
Piezo-ICSI程序:使用直徑100-mm的細(xì)胞培養(yǎng)皿上蓋,準(zhǔn)備操作盤;按照Piezo操作系統(tǒng)的要求,將4μL左右的汞從后部裝入注射針中,輕輕將汞推至針尖處,在20-25℃室溫下,準(zhǔn)備進(jìn)行顯微操作。具體操作前,首先取10枚卵母細(xì)胞置于15L含3%suerose的HEPES-CZB操作滴中備用;然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+12%PVP-360操作滴充分混合;再將單個(gè)精子從尾部吸入注射針,用Piezo脈沖從頸部斷開頭和尾;連續(xù)剪切5個(gè)精子后,將吸入全部精子頭的注射針轉(zhuǎn)移到放置卵母細(xì)胞的操作滴中,準(zhǔn)備將精子頭逐個(gè)注射至卵母細(xì)胞質(zhì)中。注射時(shí),從時(shí)鐘9點(diǎn)的方向吸住卵母細(xì)胞,使紡錘體保持在6點(diǎn)或12點(diǎn)的位置,從3點(diǎn)的方向輕輕進(jìn)針,同時(shí)用Piezo脈沖擊穿透明帶,將透明帶碎片吹出注射針的同時(shí),將精子頭吹至針尖處,繼續(xù)進(jìn)針,直至針尖插入卵母細(xì)胞深處,幾乎貼近對(duì)側(cè)質(zhì)膜時(shí),用Piezo弱脈沖擊穿卵母細(xì)胞質(zhì)膜,將精子頭吐出,回吸注入卵內(nèi)多余的操作液,輕輕退針,完成一次注射。依次操作,盡快實(shí)現(xiàn)該批卵母細(xì)胞的注射,室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎,并且移入CO?箱培養(yǎng)。依法進(jìn)行第二批卵母細(xì)胞的精子頭注射,在注射HCG后17h,完成全部卵母細(xì)胞的精子注射。PRIME TECH PMM 6可用于DNA注射。上海透明帶壓電單精注射
壓電效應(yīng)的原理是,如果對(duì)壓電材料施加壓力,它便會(huì)產(chǎn)生電位差(稱之為正壓電效應(yīng)),反之施加電壓,則產(chǎn)生機(jī)械應(yīng)力(稱為逆壓電效應(yīng))。如果壓力是一種高頻震動(dòng),則產(chǎn)生的就是高頻電流。而高頻電信號(hào)加在壓電陶瓷上時(shí),則產(chǎn)生高頻聲信號(hào)(機(jī)械震動(dòng)),這就是我們平常所說的超聲波信號(hào)。也就是說,壓電陶瓷具有機(jī)械能與電能之間的轉(zhuǎn)換和逆轉(zhuǎn)換的功能,這種相互對(duì)應(yīng)的關(guān)系確實(shí)非常有意思。壓電材料可以因機(jī)械變形產(chǎn)生電場(chǎng),也可以因電場(chǎng)作用產(chǎn)生機(jī)械變形,這種固有的機(jī)-電耦合效應(yīng)使得壓電材料在工程中得到了廣泛的應(yīng)用。例如,壓電材料已被用來制作智能結(jié)構(gòu),此類結(jié)構(gòu)除具有自承載能力外,還具有自診斷性、自適應(yīng)性和自修復(fù)性等功能,在未來的飛行器設(shè)計(jì)中占有重要的地位。北京透明帶穿孔壓電油壓注射器PMM 6 MB-D-2中等力度輸出型號(hào),適用于ICSI、ES細(xì)胞注射、活檢操作等。
壓電式破膜儀的原理壓電式破膜儀的原理基于壓電效應(yīng)。當(dāng)壓電陶瓷通電后,它會(huì)產(chǎn)生高頻振動(dòng)。這種振動(dòng)被傳遞到顯微操作針上,使針產(chǎn)生振動(dòng)。這種振動(dòng)用于在顯微操作過程中打孔或穿孔細(xì)胞膜,特別是在哺乳動(dòng)物胚胎透明帶細(xì)胞膜的穿孔任務(wù)中。壓電式破膜儀可以配合顯微操作臂和顯微注射儀使用,以提高克隆動(dòng)物中核移植、小鼠ICSI等工作的成功率。由于壓電脈沖能直接無損失地傳輸?shù)讲僮麽樕?,使得?xì)胞膜的穿孔更加精確和可靠。這種顯微操作方式提高了多種實(shí)驗(yàn)的成功率,包括胚胎干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的寒胚移植、小鼠ICSI等。此外,壓電式破膜儀操作直觀、簡(jiǎn)單快捷,具有可重復(fù)性的參數(shù)設(shè)置,實(shí)驗(yàn)參數(shù)可記憶,也可以選用人體工程學(xué)腳踏或儀器上的旋鈕進(jìn)行操作。
傳統(tǒng)的壓電陶瓷較其它類型的壓電材料壓電效應(yīng)要強(qiáng),從而得到了廣泛應(yīng)用。但作為大應(yīng)邊,高能換能材料,傳統(tǒng)壓電陶瓷的壓電效應(yīng)仍不能滿足要求。于是近幾年來,人們?yōu)榱搜芯砍鼍哂懈鼉?yōu)異壓電性的新壓電材料,做了大量工作,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)并研制出了Pb(A1/3B2/3)PbTiO3單晶(A=Zn2+,Mg2+)。這類單晶的d33比較高可達(dá)2600pc/N(壓電陶瓷d33比較大為850pc/N),k33可高達(dá)0.95(壓電陶瓷K33比較高達(dá)0.8),其應(yīng)變>1.7%,幾乎比壓電陶瓷應(yīng)變高一個(gè)數(shù)量級(jí)。儲(chǔ)能密度高達(dá)130J/kg,而壓電陶瓷儲(chǔ)能密度在10J/kg以內(nèi)。鐵電壓電學(xué)者們稱這類材料的出現(xiàn)是壓電材料發(fā)展的又一次飛躍?,F(xiàn)在美國、日本、俄羅斯和中國已開始進(jìn)行這類材料的生產(chǎn)工藝研究,它的批量生產(chǎn)的成功必將帶來壓電材料應(yīng)用的飛速發(fā)展。通過使用壓電破膜儀 PMM PIEZO-ICSI,醫(yī)生可以更加準(zhǔn)確地選擇和捕捉精子,提高受孕的幾率。
壓電破膜儀能實(shí)現(xiàn)精確操作。該儀器利用壓電效應(yīng)產(chǎn)生高頻振動(dòng),可讓操作人員更精確地操縱注射針進(jìn)入透明帶和卵細(xì)胞膜,提高注射的準(zhǔn)確性,減少對(duì)卵子的損傷。其次,能提高受精率。精細(xì)的破膜操作有助于精子更順利地進(jìn)入卵子,使受精過程更**實(shí)效,從而提升整體的受精成功率。再者,PIEZO壓電破膜儀可以降低對(duì)卵子的機(jī)械損傷。與傳統(tǒng)方法相比,其產(chǎn)生的振動(dòng)較為溫和且可控,能減少因操作力度不當(dāng)?shù)纫蛩貙?duì)卵子造成的物理傷害,維持卵子的正常生理功能和后續(xù)胚胎的發(fā)育潛力。此外,它還能縮短操作時(shí)間,熟練的操作人員使用該儀器可較好完成破膜和精子注射,提高ICSI的效率?!癙IEZO PMM 6”是一種壓電顯微操作系統(tǒng),作為壓電注射的先驅(qū),投入了大量的資源進(jìn)行其研發(fā)。北京透明帶壓電核轉(zhuǎn)移
PMM 6 MB-U-2高力度輸出型號(hào),它可進(jìn)行克隆和ICSI等方面的許多操作。上海透明帶壓電單精注射
**近幾年來,Piezo-ICSI法(壓電顯微受精法)被高度重視。使用了Piezo-ICSI法,與常規(guī)的顯微受精技術(shù)相比,對(duì)卵子的損害更小。結(jié)果顯示,用Piezo法會(huì)提高受精率,之后受精卵的發(fā)育也更好。Piezo-ICSI壓電顯微受精方法,與傳統(tǒng)ICSI顯微受精方式不同,采用平口而不是尖口的精子注射針,通過超音振動(dòng)技術(shù)打開卵子透明帶再將精子注入卵子,從而一定程度上減少了注射過程對(duì)卵子產(chǎn)生的損害,使高齡女性胚胎養(yǎng)囊率有所提升。臨床數(shù)據(jù)顯示,特別是針對(duì)一些大齡及反復(fù)受精失敗的情況,Piezo-ICSI比常規(guī)ICSI方法的受精率從66.4%提高到79.4%,受精以后的退化率(即停止**)從18.6%降低到11.9%。而妊娠率從14.9%提高到23.1%。操作穩(wěn)定性更強(qiáng)事實(shí)上相較Piezo法,常規(guī)的顯微受精方法從穩(wěn)定性上更難操作。用汽車來舉例的話,Piezo法相當(dāng)于自動(dòng)檔汽車,常規(guī)的顯微受精方法相當(dāng)于手動(dòng)檔汽車,Piezo法可以縮短培養(yǎng)師的培訓(xùn)時(shí)間。日本只有10家能做Piezo即使在日本,采用Piezo法的**也不太多。在日本有600家進(jìn)行體外受精、顯微受精的**,而采用Piezo法的**或許也就10家左右。從現(xiàn)在起Piezo法的優(yōu)勢(shì)會(huì)得以重新評(píng)估,或許10年,20年后會(huì)在世界各地得以普及。上海透明帶壓電單精注射