本實驗技術要點： **細胞比較好經過饑餓處理，并且小室上下培養(yǎng)基的FBS有濃度差，以保證細胞可以穿透基質膠。鋪細胞要均勻，濾膜底部不能產生氣泡，否則會導致細胞染色不均勻，或者局部細胞無法穿透。根據(jù)細胞類型選擇合適的膜孔徑和膜類型。PET膜兼容***，適合絕大多數(shù)種類的細胞。侵襲實驗的細胞密度比較大，一般在1 0 6cells/cm2左右，不同**細胞的接種密度、培養(yǎng)時間不同，需要參考文獻和實驗摸索。細胞太少，遷移不過去；細胞太多，可能導致正常組和實驗組無差異。細胞培養(yǎng) ，就選上海益啟生物科技有限公司，用戶的信賴之選，歡迎新老客戶來電！浦東新區(qū)培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)參數(shù)

每隔2天用電阻儀測量細胞跨膜電阻值，直到達到平臺，提示細胞已經形成致密單層；或者通過檢測熒光染料熒光黃的通過率，以判斷細胞剛好完全匯合。電阻儀測量因不傷害細胞，可以繼續(xù)培養(yǎng)而比熒光黃法更為普遍地被采用。細胞單層匯合后，用DPBS清洗一次細胞，加入含有不同濃度藥物（一般10-200μM）的緩沖液。如果要測藥物從上至下的運輸效果，則上層小室中加藥物，下層培養(yǎng)板孔里只加緩沖液；反之則相反。將培養(yǎng)板在37℃條件下培養(yǎng)（60rpm震蕩或者不震蕩）1-2h，到達時間之后，分別從細胞小室和培養(yǎng)孔里取出一定 體積緩沖液（一般50μL ）轉移至新的轉運分析板進行LC/MC分析。對于放射性標記藥物，分別取出20μL緩沖液加入100μL閃爍液，通過多孔閃爍讀板儀讀值。虹口區(qū)添加劑細胞培養(yǎng)批發(fā)益啟生物公司帶您了解細胞轉染詳情。

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