2025-07-27 01:09:00
HE染色等常規(guī)染色,組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片。原因:石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好,并且對抗原基本無影響。脂質染色(油紅O染**odipy染色,尼羅紅染色)必須做冰凍切片,不能做石蠟切片。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,ATP染色,膽固醇染色。如果標本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片,將標本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內固定(在固定液內邊解凍邊固定)。組織形態(tài)結構保存完好順序:新鮮組織立即投入固定液內固定石蠟切片>組織-80°冷凍后投入固定液內固定石蠟切片>新鮮組織立即投入固定液內固定冰凍切片>組織-80°冷凍后直接冰凍切片。HE染色小攻略技巧分析。新疆靠譜的HE染色外包
HE染色樣本組織固定與切片:首先將組織樣本進行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟,將待包埋的組織樣本放入石蠟中,確保組織位置規(guī)整。補充少許液態(tài)的石蠟后,進行降溫冷凍,使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達到組織固定的效果,然后使用石蠟切片機進行切片,厚度在4-8um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟:將待測組織樣本切片放于二甲苯中,充分浸泡10min,浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min,目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解,這樣可以在進行染液染色的時候,染液可以充分進入組織種,同時,二甲苯還可以起到透明的作用,使切片更容易觀察。福建專業(yè)的HE染色報告HE染色是病理實驗中比較用的一種基礎染色方法。
HE染色實驗步驟:(1)樣品制備:對于貼壁生長細胞,胰酶消化,調整細胞濃度約1×105/ml,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),培養(yǎng)相應時間后,取出細胞爬片,用PBS洗滌3次。(2)樣品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗滌2次,每次1min。(3)染核:蘇木素染液染色2-3min,自來水洗滌。(4)分色:鏡下觀察,若細胞核染色過深,用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒,自來水洗滌。(5)染胞質:浸入伊紅染液染色1min,自來水洗滌。(6)吹干或自然晾干細胞爬片后,中性樹膠封片。若細胞用4%多聚甲醛固定,則染色時間相應延長,蘇木素染色12-15min,伊紅5min即可
HE染色原理1、細胞核染色的原理:蘇木精為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA,在DNA的雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。2、細胞漿染色的原理:伊紅是一種化學合成的酸性染料,在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質,為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質等電點(4.7—5.0)以下時,胞漿蛋白質以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合,使細胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。HE染色,南京英瀚斯,專業(yè)的實驗外包公司。
HE染色反藍的原理:蘇木素染液,細胞核內的染色質主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結構中,兩條鏈上的磷酸基向外,帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。 分化:蘇木素染色之后,用水洗去未結合在細胞上的染液,但是在細胞核中結合過多的染料和細胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去,才能保證細胞核和細胞漿染色的分明,把這個過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結構,使色素與組織解離,分化不可過度。藍化:分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài),而呈藍色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木精染上的細胞核變呈藍色,稱藍化作用,一般多用自來水浸洗即可變藍,也可用溫水(50度溫水比較好)變藍。海馬組織HE染色如何觀察。新疆值得信賴的HE染色公司
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HE染色主要是為通細胞及胞核形態(tài)、大小來區(qū)別各種細胞的,并不是直接通過顏色來區(qū)分的,HE染色細胞壞死的三種改變:(1)細胞核的改變:這是細胞壞死的主要形態(tài)標志,表現(xiàn)為核濃縮,核碎裂,核溶解。(2)細胞質的改變:由于胞質發(fā)生凝固或溶解,HE染色呈深紅色顆粒狀,如肝細胞壞死出現(xiàn)的嗜酸性小體醫(yī)學|教育網(wǎng)搜集整理。(3)間質的改變:由于各種溶解酶的作用,基質崩解、膠原纖維腫脹、斷裂或液化,與壞死的細胞融合成一片,呈紅染的顆粒狀無結構物質。南京英瀚斯生物新疆靠譜的HE染色外包