2025-07-29 00:15:16
HE染色法,。蘇木精染液為堿 ,主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸染料 ,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。而線粒體用HE染色不可見,活細胞通常要求活細胞近似無色線粒體需要用健那綠來染色,再在高倍鏡下觀察。從人或動物新鮮尸體上取下塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預先配好的固定液中(10%福爾馬林,Bouin氏固定液等)使、細胞的蛋白質(zhì)變凝固,以防止細胞后的自溶或細菌的分解,從而保持細胞本來的形態(tài)結構。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,逐漸脫去塊中的水份。再將塊置于既溶于酒精,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,以二甲苯替換出塊的中酒精,才能浸蠟包埋。HE染色是組織學、病理學教學與科研中比較基礎、使用比較普遍的技術方法之一。浙江病理HE染色多少錢
HE染色主要是為通細胞及胞核形態(tài)、大小來區(qū)別各種細胞的,并不是直接通過顏色來區(qū)分的,HE染色細胞壞死的三種改變:(1)細胞核的改變:這是細胞壞死的主要形態(tài)標志,表現(xiàn)為核濃縮,核碎裂,核溶解。(2)細胞質(zhì)的改變:由于胞質(zhì)發(fā)生凝固或溶解,HE染色呈深紅色顆粒狀,如肝細胞壞死出現(xiàn)的嗜酸性小體醫(yī)學|教育網(wǎng)搜集整理。(3)間質(zhì)的改變:由于各種溶解酶的作用,基質(zhì)崩解、膠原纖維腫脹、斷裂或液化,與壞死的細胞融合成一片,呈紅染的顆粒狀無結構物質(zhì)。南京英瀚斯生物西藏比較好的HE染色常用HE染色試劑配制方法。
HE染色是目前國內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法。切片質(zhì)量的好壞,可直接影響疾病診斷的及時與準確性。因此,能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片,是必須掌握的技術之一。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定,固定狀態(tài)良好后,嚴格按照本單位病理實驗檢測SOP程序進行修剪、脫水、包埋、切片、染色、封片***鏡檢合格的樣片。在顯微鏡下瀏覽切片或瀏覽數(shù)字切片,在不同倍數(shù)下詳細觀察組織切片情況,對切片中基本病理改變?nèi)绯溲?、淤血、出血、水腫、變性、壞死、增生、纖維化、機化、肉芽組織、炎性變化等情況文字描述,并反映出片子之間的差異。對典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標識。
HE染色原理:一、細胞核染色原理:蘇木精為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA的雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。二、細胞漿染色原理:細胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物、細胞漿的染色與pH值有密切關系,當pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點4.7-5.0時,胞漿對外不顯電性,此時酸或堿性染料不易染色。當pH調(diào)到6.7-6.8時,大于蛋白質(zhì)的等電點pH值,表現(xiàn)酸性電離,而帶負電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染色,現(xiàn)時胞核也被染色,核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點以下,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),就可被帶負電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學合成的酸性染料,在水中離解成帶負電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽離子)結合而使細胞漿染色,細胞漿、紅細胞、肌肉、結締組織,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,與藍色的細胞核形成鮮明的對比肝臟組織HE染色如何觀察。
HE染色全名為蘇木精和伊紅染色方法,是**基本的病理學染色技術。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍,如處理適宜,可使細胞核著清楚的深藍色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態(tài)結構特點均可顯示出來。質(zhì)量好的HE具備條件1.細胞核與細胞漿藍紅相映,鮮艷亮麗;2.胞核鮮明、核膜、核染色質(zhì)顆粒均清晰可見;3.組織或一般結構特點及假物質(zhì)成分均能顯示出來。HE染色,優(yōu)先南京英瀚斯生物。福建專業(yè)的HE染色報告
HE染色(脫蠟、水化、染色、脫水、封片) - 實驗方法。浙江病理HE染色多少錢
HE染色注意事項:1、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長,組織酸化而影響細胞核著色。因此,要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min,這樣可以使細胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳,可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后,分色這一步是關鍵,應在顯微鏡下控制進行,一般以細胞核染色清楚(晰)而細胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導致染色太淺,應重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后,入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài),此為脫水不徹底,應將切片退回無水酒精,更換酒精、二甲苯,以求徹底脫水與透明。4、在染色過程中不要讓切片干燥,以免切片收縮、變形,影響神經(jīng)元形態(tài)。5、切片從二甲苯取出或進入二甲苯前,切片周邊均應擦干凈或吸干多余水分。6、***封固時,要用中性樹脂,防止日后褪色,蓋片要選大于組織塊的面積,如漏出一部分不久將會褪色,所用樹脂濃度要適當,樹脂封固時不能有氣泡。浙江病理HE染色多少錢